Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Артюхов В.Г. -> "Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами" -> 82

Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами - Артюхов В.Г.

Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами — Воронеж, 2000. — 296 c.
ISBN 5-7455-1162-1
Скачать (прямая ссылка): biologicheskiemembrani2000.pdf
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 113 >> Следующая

При анализе оптической активности веществ, в том числе белков и полипептидов, наиболее удобной величиной является молярное вращение [М]х, связанное с удельным вращением [а]х следующим уравнением:
[М]х = [а]х* М/100.
В качестве молекулярной массы М применяют среднюю массу М аминокислотного остатка из числа остатков, составляющих полипептидную цепь белковой макромолекулы. Кривые дисперсии оптического вращения и кругового дихроизма в области эффекта Коттона, где поглощение обусловлено основной поли-пептидной цепью, отражают вторичную структуру белковых молекул. Изучение и анализ кривых ДОВ и кругового дихроизма для таких конформаций, как а-спираль, (^-структура, неупорядо-
ченная конформация, проводятся на основании результатов исследования синтетических полипептидов (полиглутаминовой кислоты или полилизина), а также по экспериментальным данным для белков, структура которых установлена методом рентгеноструктурного анализа.
Круговой дихроизм (эффект Коттона) — это различие поглощения для света правой и левой круговых поляризаций. Эффект Коттона является одним из лучших современных методов характеристики природы спиральных конформаций и оценки степени спиральности белковых молекул.
Микрокалориметрия — информативный метод исследования термодинамических характеристик вещества, в частности, температурного хода теплоемкости. Современные чувствительные микрокалориметры используют для исследования фазовых переходов (определения изменений энтальпии и энтропии этих процессов) в водно-липидных суспензиях с использованием небольших (несколько мг) количеств материала. Принцип метода дифференциальной сканирующей калориметрии состоит в измерении количества тепла, необходимого для увеличения температуры объекта на очень малую величину в пределах узкого температурного интервала при постоянном давлении.
Для изучения фазовых переходов при плавлении фосфоли-пидных бислоев измеряют теплоемкость Ср суспензии фосфолипидов при разных температурах в области фазового перехода. Показано, что в этой .области происходит резкое возрастание значения С . Максимум теплоемкости на кривой зависимости Ср от температуры соответствует температуре плавления. Площадь под пиком на указанной кривой соответствует общему количеству тепла, поглощаемому при переходе из твердого состояния липидного слоя в жидкое (фазовый переход). Для чистых липидов величины изменения энтальпии и энтропии для перехода кристалл — жидкий кристалл линейно зависят от длины углеводородных цепей. В целом температура плавления понижается в ряду: холины — этаноламины — серины. Типичные зависимости избыточной удельной теплоемкости от температуры для ди-пальмитоилфосфатидилхолина имеют два максимума. Максимум при более высокой температуре соответствует собственно переходу при температуре Тп (температуре плавления), другой характеризует так называемый предпереход, при котором происходит трансформация одномерной ламеллярной решетки в двумерную,
образованную искаженными слоями липида и нарушенную периодическими складками.
Водные дисперсии, содержащие два или более липидных компонентов, проявляют гораздо более сложные термотропные свойства.
Метод моделирования и получения искусственных мембран основан на получении и исследовании моно- и бимолекулярных липидных слоев, везикул, липосом и протеолипосом. Существует два основных типа искусственных мембран: классические плоские и сферические мембраны различного размера. Для получения искусственных мембран используют различные фосфатиды, нейтральные глицериды, смеси липидов биологического происхождения, добавляя к ним холестерин, а-токо-ферол и другие минорные добавки. Потенциальная ценность искусственных мембран для исследований зависит от возможности включения в них природных белков, в особенности тех, которые обладают транспортными свойствами. Липосомы, состоящие из белков и липидов, стали получать в 60-е гг.; термин “протеолипосомы” был введен В. П. Скулачевым. В настоящее время разработан целый ряд методов приготовления различных типов липосом и протеолипосом, а также их стандартизации по размерам, структуре, гомогенности, стабильности и другим характеристикам. Липосомы используют для доставки в клетку лекарственных и химических соединений, стабилизации ферментов в инженерной энзимологии, введения в клеточные мембраны молекул зондов, модифицирующих и моделирующих их поверхность. Большой интерес для генной инженерии и медицины представляют работы по введению в клетки при помощи липосом нуклеиновых кислот и вирусов. В липосомы включают митохондриальные компоненты и изучают на таких модельных системах процессы генерации энергии в клетках. Ультра-тонкие искусственные мембранные структуры — полислои Лен-гмюра—Бложе (ПЛБ) — применяют для получения био- и иммуносенсоров. Создаются ПЛБ с иммобилизованными ферментами и компонентами иммунологических систем. При использовании смешанных липид-белковых пленок ПЛБ получают информацию о функционировании белков и о липид-белковых взаимодействиях в мембране. Результаты изучения физических характеристик, проводимости, проницаемости и других свойств искусственных липидных мембран имеют большое зна-
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 113 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed