Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Артюхов В.Г. -> "Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами" -> 73

Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами - Артюхов В.Г.

Артюхов В.Г., Наквасина М.А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами — Воронеж, 2000. — 296 c.
ISBN 5-7455-1162-1
Скачать (прямая ссылка): biologicheskiemembrani2000.pdf
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 113 >> Следующая

На рис. 55, б представлена зависимость «доза — эффект» для изоформы ЛДГ из сердца свиньи в полулогарифмических координатах. Эта зависимость удовлетворительно описывается прямой. Константа скорости инактивации фермента составляет
1,41*10~4 с-1 и t. =1690 с = 28 мин, что позволяет сделать вывод
1/&
о меньшей фоточувствительности изофермента Н4 по сравнению с М4. При добавлении к раствору ЛДГ до облучения азида натрия остаточная ферментативная активность оказалась выше таковой для облученной в соответствующих дозах свободной изоформы (см. рис. 55, б).
Ai—А2, %
Рис. 56. Сравнение протекторного эффекта азида натрия по отношению к сердечной и мышечной изоформам ЛДГ при различных дозах УФ-облучения: 1 — протекторный эффект NaN3 для мышечной изоформы; 2 — для сердечной изоформы. По оси ординат отложена разность между уровнями ферментативной активности ЛДГ, УФ-облученной в смеси с азидом натрия (Ах) и в свободной форме (А2)
На рис. 56 представлена зависимость протекторного эффекта азида натрия от дозы УФ-облучения по отношению к мышечной и сердечной изоформам ЛДГ. Анализ полученных данных позволяет сделать заключение о неоднонаправленном характере действия модификатора: максимальное защитное действие азида натрия наблюдается для ЛДГ (М4) при дозах облучения 3,02—6,04 кДж/м2, а по отношению к ЛДГ (Н4) — 6,04—9,06 кДж/м2. Вели предположить, что основной вклад в фотопротекторный эффект NaN3 вносит процесс тушения Юи, то этот активный интермедиат оказывает влияние на изменение ферментативной активности изоформ ЛДГ при вышеуказанных дозах облучения.
Наиболее широко распространено представление о том, что дезактивация Ю2 (3-каротином, взаимодействующим с ним преимущественно по физическому механизму, связана с переносом энергии от синглетного кислорода на низколежащий триплетный уровень каротина. Обсуждается вопрос о вкладе в рассматриваемый процесс комплекса с переносом заряда между 102 и каротином. Константа скорости дезактивации синглетного кислорода близка к диффузионной и составляет для СС14 74 О9 л-(моль-с)'1. Гистидин относят к типу акцепторов Ю2: его дезактивация осуществляется химическим путем. Константа скорости kq для этой аминокислоты составляет 5*107 Л'(моль*с)-1 в метаноле; в D20 — 108 л-(моль'с)"1. В реакцию с Ю2 вступает только непротонированная форма гистидина. Из анализа рис. 54, б следует, что {3-каротин в концентрации 3,340”в моль/л оказывает защитное действие по отношению к молекулам ЛДГ (М4): активность УФ-облученного в дозе 2,27 кДж/м2 белка восстанавливается на 18 % по сравнению с таковой в отсутствие протектора. Гистидин в концентрации
3,3-10-2 моль/л снижает степень инактивации ЛДГ на 19 % (см, рис, 54, в), что согласуется с данными, полученными при использовании (3-каротина,
Облучение ЛДГ в присутствии D-маннита, являющегося акцептором ОН-радикалов, сопровождается снижением ее фоточувствительности: константа инактивации составила 4,040 4 с a t1/2 = 1732 с = 29 мин (рис. 55, а). Дозовая кривая имеет экспоненциальный характер. При изучении сочетанного воздействия Р-каротина и D-маннита на уровень активности УФ-облученной ЛДГ выявлен четко выраженный эффект аддитивности действия этих агентов (рис. 54, в). Полученные результаты свидетельствуют о том, что их протекторное действие связано с реализацией
различных каналов защиты белка от УФ-повреждения: элиминированием Ю2 и ОН-радикалов.
При УФ-облучении ЛДГ (М4) из скелетных мышц свиньи в присутствии серотонина установлено его фотопротекторное действие по отношению к молекулам этой изоформы: kf =3,5-10~4 с'1 и t — 1980 с = 33 мин (см. рис. 55, а).
На рис. 57 показаны фотоиндуцированные изменения функциональных свойств ЛДГ (изоферменты Н4, Н3М, Н2М2) эритроцитов крови человека после УФ-облучения в присутствии серотонина. Введение в облучаемую систему экзогенного агента в концентрации 10~8 моль/л приводит к проявлению его защитного действия только при использовании максимальной дозы УФ-света (4,53 кДж/м2), вызывающей наиболее глубокие изменения в структуре молекулы фермента и приводящей к падению его активности на 35 % по сравнению с контрольным образцом. Увеличение концентрации серотонина до 10“7 моль/л индуцирует резкое усиление его фотопротекторного эффекта, наиболее ярко проявляющегося при облучении ЛДГ в дозах 1,51 и 4,53 кДж/м2, При использовании биогенного амина в концентрации 10~й моль/л отмечается снижение его защитного действия при воздействии УФ-излучения в дозах 1,51 и 4,53 кДж/м2 по отношению к этому показателю при концентрации серотонина 10~7 моль/л. Протекторный эффект 5-окситриптамина может быть связан либо с акцепцией различных активных интермедиатов, в том числе и 102, либо с образованием комплекса фермент — биогенный амин, более фоторезистентного, чем свободный белок.
А, %
Рис. 57. Зависимость уровня каталитической активности лактатдегидрогеназы эритроцитов человека в свободном состоянии и в присутствии серотонина от дозы УФ-облучения: 1 — УФ-облучение без модификатора; УФ-облучение в присутствии серотонина: 2 — в концентрации 10~6 моль/л, 3 — 10"7 моль/л, 4— 10"8 моль/л
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 113 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed