Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Фирма Бекк в Лондоне изготовляет новый зеркальный микроскоп. Отличительной его особенностью является то, что, помимо обычного перемещения тубуса путем грубого и тонкого движения вверх и вниз и центрируемого конденсора,
Рис. 6. Ирисовая диафрагма фирмы Бекк в Лондоне, с помощью которой может быть уменьшена апертура объектива.
столик также может перемещаться по вертикали в пределах 1/4|М, благодаря чему препарат может просматриваться на различную глубину.
2. 1. 1. Иммерсионные объективы
Различают сухие объективы, при применении которых между покровным стеклом и фронтальной линзой должен находиться воздух, и иммерсионные объективы, в которых средой в указанном промежутке служит
Рис. 7. Ахромат. Масляная иммерсия, выпускаемая Народным предприятием Карл Цейсс в Иене, с ирисовой диафрагмой.
I
- ______________J
Рис. 8. Апохромат. Масляная иммерсия (Народное предприя- ) тие Карл Цейсс в Йене).
жидкость (см. главу 1, раздел 1.3). Апертура сухих объективов может достигать 0,95, объективов с водной иммерсией — 1,25, с кедровым маслом или же с обычными масляными иммерсиями (кедровое масло заменяется в настоящее время синтетическими маслами) — 1,40, с монобромнафталиновой иммерсией — 1,60.
В настоящее время последняя величина остается предельной.
Обычно говорят о гомогенной масляной иммерсии. Что следует понимать под словом «гомогенная»? Поскольку показатель преломления кедрового масла почти равен показателю преломления стекла — разница между 1,52 и 1,51 практически не имеет значения (см. главу 1, раздел 1.3), — свет от объекта проходит через оптически однородную среду. Поэтому масляные иммерсии называются гомогенными. Но в настоящее время не во всех случаях можно говорить о гомогенных масляных иммерсиях, так как для
изготовления фронтальных линз часто употребляется стекло более или менее значительно отличающееся по своим оптическим константам от масла. Монобромнафталиновые иммерсии — специальные иммерсии и поэтому описывать их нет необходимости. Водные иммерсии, не являющиеся гомогенными, используются преимущественно для прижизненного изучения биологических объектов в водных средах. Помимо этого, имеются объективы с глицериновой иммерсией, фронтальная линза которых изготовляется из кварца с показателем преломления 1,458. При работе с такими иммер-
Рис. 9. Влияние иммерсионной жидкости (схематическое изображение).
а—воздух; л = 1,00; b — объект; с—покровное стек-ф ло; d — световые лучи» только дифрагировавшие; е —
световые лучи, преломившиеся после дифракции; д — вода, п = 1,33; / — лучи; h — объект; i — покровное стекло; / — монобромнафталин; п = 1,66; к — объект; р — покровное стекло.
сиями пользуются кварцевыми предметными и покровными стеклами. Поскольку показатель преломления глицерина равен 1,456, мы имеем здесь дело также с гомогенными иммерсиями с той лишь разницей, что их не обозначают этим термином, чтобы не давать повода предполагать, будто при этом можно пользоваться обычным иммерсионным маслом. Глицериновые иммерсии применяются в исследованиях по коллоидной химии, ввиду того что коллоидные частицы не так легко адсорбируются в чистой кварцевой камере, как на стекле.
С/ О б ъ е к т и в ы для микроскопических исследований
( в проходящем свете изготовляются с расчет о м___________________н а
, птГй~мёне н йе покроиных р. тек о л. О б ъ е к т и-в ы, предназначенные для работы без покровных стекол, применяются при микроскопических исследованиях в падающем свете и будут описаны в соответствующем разделе (<Ai. главу 7, раздел 7.3).
Как было показано в главе 1, разделе 1.3, на внешней поверхности покровного стекла дифракционные максимумы дополнительно отклоняются в сторону от оптической оси. При употреблении гомогенной масляной иммерсии это явление устраняется. В водной иммерсии наблюдается уже некоторое отклонение дифракционных максимумов, однако, значительно меньшее, чем в случае, если средой между покровным стеклом и фронтальной линзой служит воздух. Если показатель преломления иммерсионной жидкости превышает показатель преломления покровного стекла, то дифракционный максимум на поверхности стекла может быть даже сдвинут к оптической оси. Это имеет место при использовании в качестве иммерсионной жидкости монобромнаф-талина (п = 1,66). Правда, теоретически возможная разрешающая способность может быть достигнута лишь в том случае, если и среда, в которую заключен препарат, и покровное стекло имеют одинаковый с иммерсионной жидкостью показатель преломления. Вследствие этих осложнений объективы с монобромнафталиновой иммерсией изготовляются в настоящее время только для объектов, рассматриваемых без покровного стекла. *
