Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Существуют и другие причины, обусловливающие необ-чаходимость перемещения конденсора в вертикальном направлении.
Нанесение на конденсор иммерсионного масла облегчается предварительным опусканием осветительного аппарата; после нанесения масляной капли конденсор вновь медленно поднимают кверху. Фронтальную линзу также легче снимать при опущенном конденсоре.
5.3. ВОЗНИКНОВЕНИЕ РЕЛЬЕФНЫХ ИЗОБРАЖЕНИИ
1. Лучи, освещающие объект, могут быть частично затемнены. Тогда возникают тени, обусловливающие появление рельефных изображений. Для этого употребляют темные неофановые или дымчатые фильтры, которые заполняют лишь половину диаметра диафрагмы и которые можно заказать в любой оптической мастерской. Такие диафрагмы называют полулунными. Они затемняют половину отверстия конденсора.
2. Другой метод повышения пластичности изображений заключается в том, чтобы исключить центральные лучи с низкой апертурой. Для этого служат вкладываемые в дер-
Рис. 62. Диафрагма в форме полумесяца.
Рис. 63. Центральная диафрагма-заслонка при освещении проходящим светом по методу светлого поля (пример). 33 мм — полный диаметр апертурной диафрагмы конденсора; 17,9 мм — диаметр затянутой диафрагмы конденсора; 8,9 мм — диаметр центральной диафрагмы-заслонки.
жатель центральные диафрагмы-заслонки, имеющие диаметр в половину апертуры применяющегося объектива. После установки соответствующего объектива смотрят в его заднюю линзу. Диафрагму апертуры конденсора раскрывают до тех пор, пока ее края не совпадут с краями задней линзы объектива.
В этом положении диаметр центральной диафрагмы-заслонки должен быть наполовину меньше диаметра диафрагмы конденсора.
Изготовление центральных диафрагм крайне просто в оптической мастерской заказывают плоское стеклышко по размерам держателя фильтра. На центральную часть стеклышка наклеивают кружок черной бумаги с диаметром, меньшим, чем диаметр центральной диафрагмы-заслонки, употребляющейся при работе по методу темного поля.
5.4. КОСОЕ ОСВЕЩЕНИЕ
Большие возможности для опытных микроскопистов открывает редко применяющееся косое освещение, с помощью которого можно удвоить разрешение и повысить контрастность изображения (путем достижения рельефности). Правда, возникающие при зтом азимутальные искажения вызывают появление структур, которых на самом деле не существует.
Как же осуществляют косое освещение?
1. Путем д е ц е н т р и р о в а н н о й установки зеркала в случае отсутствия конденсора. У современных приборов это не всегда легко достигается, так как зеркало закреплено соответственно оптической оси микроскопа. В этом случае нужно придать косое направление световому конусу (см. рис. 65,а).
2. Путем децентрированной установки диафрагмы апертуры на конденсоре или ниже его. У большого осветительного аппарата Аббе имеется возможность установить ирисовую диафрагму эксцентрично к оптической оси с помощью особой градуированной кремальеры и затем поворачивать ее в этом положении, чтобы освещать препарат в отдельных азимутах (см. рис. 73). Более старые конденсоры имеют две лежащие одна на другой диафрагмы, из которых одну можно устанавливать эксцентрично, а другую — нельзя.
3. Путем вкладывания в держатель, находящийся под конденсором, диафрагм с эксцентрично расположенными отверстиями или секторных.
Следует иметь в виду, что для слабых увеличений де-центрированное освещение имеет меньшее значение. Апер-
тура применяющихся при этом объективов так мала, чго удвоение разрешающей способности в этом случае почти не имеет значения; речь может идти только о повышении контрастности.
Рис. 64. Сравнение вертикального и косого освещения (по снимкам Народного предприятия Карл Цейсс в Йене). Масштаб изображения 800 : 1.
а — вертикальное освещение; б — косое освешение с децентри-рованной диафрагмои конденсора. В левой нижней части рисунка разрешение значительно лучше, чем в том же месте рис а, однако здесь появляются азимутальные искажения,
Децентрированную диафрагму можно сужать и расширять. Чем больше она затянута, тем контрастнее становятся изображения, хотя они и не так ярки. Контрасты возни кают благодаря появлению резких теней (см. рис. 66 и 67).
Рис. 65. Децентрирование зеркала миьроскопа.
1 — при неподвижно закрепленной|вилке зеркала, 2 — при качающемся’креплении вилки зеркала, а — зеркало с вилкой, фиксированной на оптической оси; 16 — точка вращения; е — оптическая ось, г—точка вращения; д — вилка зеркала; е — установка зеркала при децентрированном освещении; ж — вращающееся зеркало.
Рис. 66. Положение децентриро-ванной диафрагмы, при котором достигается появление резких теней.
Рис. 67. Возникновение теней при падении лучей снизу.
а — область резкой тени; б — объект. в — предметное стекло, г — лучи света’
Рис. 68. Децентрированное освещение.
33 мм — полный диаметр апертурной диафрагмы конденсора, 17,9 мм — диаметр диафрагмы конденсора в случае, когда АН равна А объектива; 8,9 мм — диаметр децен трированн ой диафрагмы.
