Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Прозрачные неокрашенные объекты становятся видимыми^ только благодаря различию в преломлении по отношению к окружающей среде. Что касается объектов, расположенных в оптически менее плотной среде, то они выглядят, как стеклянные шарики в воздухе (первый случай). Объекты, находящиеся в оптически более плотной среде, выглядят, как пузырьки воздуха в стекле (второй случай)
Следствием этого является то, что при резкой наводке на поверхность объекта последний кажется очерченным темной, отсутствующей на самом деле каймой, которая в первом случае сужается при опускании тубуса, а во втором случае расширяется.
Если объекты имеют шаровидную форму, то при применении плоского зеркала и соблюдении принципа освещения Кёлера возникает как бы плавающее изображение источника света в первом случае над объектом, а во втором — под объектом, т. е. объект ведет себя как собирательная или же рассеивающая линза.
При одностороннем косом освещении в первом случае темным кажется край объекта, противоположный источнику света, а во втором случае — расположенный ближе к нему. При этом принимается во внимание перевернутость микроскопического изображения.
Глава 4
* ИСТОЧНИКИ СВЕТА ДЛЯ МИКРОСКОПИИ
4.1. ТРЕБОВАНИЯ, ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ХОРОШЕМУ ОСВЕТИТЕЛЮ ДЛЯ МИКРОСКОПИРОВАНИЯ
Освещению микроскопических препаратов придается особое значение. Если оно осуществляется технически неверно, то и при хорошем микроскопе не будут использованы все возможности прибора.
Хорошее освещение для целей микроскопии должно отвечать следующим требованиям:
1. Источник света должен излучать яркий, по возможности белый свет и обладать компактным телом накаливания. Если, например, пользоваться электрической лампочкой с широкой спиралью (нитью накала), то свет осветителя распределяется на освещаемой поверхности неравномерно — в области спирали он сильнее, чем на некотором удалении от нее. Для освещения помещений это не имеет значения, но очень мешает при микроскопировании. Применяя матовые стекла, можно достигнуть более или менее равномерного распределения света на освещаемой поверхности, но при этом теряется много света.
2. Осветитель должен хорошо вентилироваться, но в то же время его следует заключать в светонепроницаемый кожз^х. Бывает в высшей степени неприятно, если свет от стоящего обычно перед микроскопом осветителя падает во время работы прямо в глаза.
3. Хорошие осветители для микроскопирования должны быть оснащены системой линз, называемой коллектором, повышающим выход света (хроматические и апланатические коррекции линз коллектора не являются при этом безусловно необходимыми). Действующее отверстие коллектора может быть ограничено концентрической ирисовой диафрагмой, так называемой д иафрагм ой поля зрения. Источник света ме^ег Цёрёмещаться относительно коллектора или же наоборот.
4. Желательно, чтобы в осветители можно было помещать светофильтры или матовые стекла, причем последние следует вставлять между коллектором и диафрагмой поля. Светофильтры можно располагать в любом
Рис. 41. Установка освещения: затягивают диафрагму поля; путем вертикального перемещения конденсора добиваются резкого изображения видимого светлого пятна и в случае необходимости перемещают его в центр поля зрения (центрируют), а затем открывают диафрагму поля до тех пор, пока все поле зрения не будет освещено. Апертурная диафрагма остается при этом открытой. При наблюдении ею пользуются по мере надобности. Эрнст Лейтц. Ветцлар.
месте по ходу лучей осветителя. При этом необходимо помнить о том, что при помещении фильтров вблизи от диафрагмы поля их дефекты появятся и в микроскопическом изображении.
‘ 5. Универсально пригодные для микроскопирования
осветители должны быть закреплены на штативе такой конструкции, которая обеспечивала бы возможность их перемещения по вертикали (при освещении объекта проходящим и падающим светом).
6. Для большего удобства пользования осветителем употребляют металлические планки, которые обеспечивают жесткое соединение осветителя с микроскопом на необходимом расстоянии от зеркала микроскопа.
4.2. ПРИНЦИП ОСВЕЩЕНИЯ КЁЛЕРА
Если в распоряжении имеется все оборудование, перечисленное в главе 4, разделе 4.1, то с его помощью можно добиться полноценного освещения; при этом необходимо соблюдать принцип Кёлера. Освещение по Кёлеру требует выполнения следующих условий.
1. Источник света, коллектор, диафра1 ма поля и держатель диафрагмы должны быть размещены в определенном порядке. Дальше всего от микроскопа устанавливается источник света. Непосредственно перед ним помешают тонко-матированное стекло, устраняющее неравномерность освеще-
i ни я. Стеклянный баллон лампы делают матовым. Далее следует коллектор, затем держатель диафрагмы и ближе всего к микроскопу должна находиться в осветителе диафрагма поля (на расстоянии около 30 см от микроскопа).
2. Путем соответствующего передвижения коллектора, а также приближением или удалением всего осветителя% добиваются возникновения четкого изображения нити накала j источника света на затянутой диафрагме конденсора так, чтобы это изображение полностью заполняло бы отверстие конденсора.
