Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.
Скачать (прямая ссылка):
А
HB4=—z=—
/ a-b '
где НВЧ — наиболее вероятное число цитопатогенных единиц в
I мл:
А — общее число пробирок с дегенерированными культурами клеток;
а — общий объем исследуемого материала;
Ь — объем материала, При внесении которого не наблюдали дегенерацию.
Для иллюстрации техники вычисления по формуле разберем гипотетический пример.
Четыре группы пробирок с монослоем клеток (каждая группа состояла из 5 пробирок) заражали вирусом в разведении 1 : 1000. В первую группу вносили 0,4; во вторую — 0,1; в третью — 0,025 и в четвертую — 0,0025 мл инфекционного материала. Цитопато-генные изменения отмечены в 5 культурах первой, 4 культурах второй и одной культуры третьей группы. Все культуры четвертой группы выглядели нормальными.
Общее число пробирок с пораженными клетками равно
4 +1+0=5 (первое разведение, обусловившее дегенерацию во всех пробирках, в расчет не принимают). Вычисляем общий объем исследуемого материала:
а=(0,1 ¦ 5) ~ (0,025 * 5) 4- (0,00625 ¦ 5); а=0,656.
Находим значение в:
b = (0,1 ¦ 1)+(0,025 ¦ 4) -{- (0,0065 • 5); й=0,23.
Подставляют в формулу найденные значения А, а и fc,
нвч-т=^= ~=l. = “=13,16.
У 0,656-0,23 У 0,15 0,38
Поскольку исследуемый материал был разведен в 1000, НВЧ цитопатогенных единиц равна 13,16- 1000=13 160.
Приложение ] Таблица значений t для уровней значимости опыта (р) 0,05 и 0,0| и значении х2 для уровня значимости 0,05
Число степеней свободы t X?
Р=0,05 р= одл р~ 0,05
1 12,706 63,657 3,841
2 4,303 9,925 5,991
3 3,182 5,841 7,815
4 2,776 4,604 9,488
5 2,571 4,032 11,070
6 2,447 3,707 12,592
7 2,365 3,499 14,067
8 2,306 3,355 15,507
9 2,262 3,250 16,919
10 2,228 3,169 18,307
II 2,201 3,106 19,675
12 2,179 3,055 21,026
13 2,160 3,012 22,362
14 2,145 2,977 23,685
15 2,131 2,947 24,996
16 2,120 2,921 26,296
17 2,110 2,898 27,587
18 2,101 2,878 28,869
19 2,093 2,861 30,144
20 2,086 2,845 31,410
21 2,080 2,831
22 2,074 2,819
23 2,069 2,807
24 2,064 2,797
25 2,060 2,787
26 2,056 2,779
27 2,052 2,771
28 2,048 2,763
29 2,045 2,756
30 2,042 2,750
со 1,960 2,576
Вычисление наиболее вероятного числа цитопатогенных единиц (НВЧЦЕ) по результатам заражения тремя разведениями вируса пробирок с культурой
ткани
Дегенерация при заражении НВЧЦЕ Дегенерация при заражении НВЧЦК
I мл 0,25 мл 0,0625 мл 1 мл 0,25 ил 0,062,5 мл
0* 0 1 0,153 1 0 0 0,165
0 0 2 0,308 1 0 I 0,333
0 0 3 0,464 1 0 2 0,504
0 0 4 0,622 1 0 3 0,677
0 0 5 0,781 1 0 4 0,853
0 1 0 0,155 1 0 5 1,03
0 1 I 0,312 1 1 0 0,338
0 1 2 0,472 1 1 1 0,512
0 ] 3 0,632 1 1 2 0,688
0 1 4 0,793 1 1 3 0,867
0 1 5 0,957 1 I 4 1,05
0 2 0 0.317 1 1 5 1.23
0 2 ] 0,479 I 2 0 0,521
0 2 2 0,641 1 2 1 0,700
0 2 3 0,806 1 2 2 0,883
0 2 4 0,972 1 2 3 1,07
0 2 5 1,14 I 2 4 1.26
0 3 0 0,486 1 2 5 1,45
0 3 1 0,651 1 3 0 0,712
0 3 2 0,818 1 3 1 0.898
0 3 3 0,988 1 3 2 1,09
