Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 81

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 75 76 77 78 79 80 < 81 > 82 83 84 85 86 87 .. 101 >> Следующая

Эпителий почки эмбри о. 1(Г2 0 63
онов крыс...... 1
Эпителий почки эмбри + 10-* 0 70
онов морской свинки
Эпителий почки эмбри -1. 10~5 0 45,9
онов кролика ....
А2 (1957) Эпителий почки обезья 10~3 0 88
ны ........
Клетки СОИ..... + 10--2 1:2 75
Эпителий почки эмбри 10~3 0 39
она мыши .....
Эпителий почки эмбри _1_ 1 1(Г3 0 57
она крысы . , 1
Эпителий почки эмбри 10---8 0 53
она морской свинки
Эпителий почки эмбри 1 10~3 0 51.3
она кролика ....
В тех случаях, когда поле зрения сплошь покрыто эритроцитами, интенсивность реакции определяли + + + + крестами. При реакции в + + + креста видны отдельные клетки или группы клеток, окруженные венчиком из эритроцитов. При отрицательных результатах эритроциты свободно оседают на дно.
В табл. 23 приводится протокол опыта В. Д. Соловьева и А. К- Алексеевой (1959), который показывает, что реакция задержки гемадсорбции вполне специфична и позволяет выявлять антитела к вирусу гриппа в достаточно высоком титре.
Бакли (1959) сообщила об успешном применении реакции гемадсорбции для выявления в культуре ткани вирусов восточного лошадиного энцефаломиелита, Sindbis, киасанурской лесной лихорадки и энцефалита Западного Нила. Методика постановки
реакции при изучении указанных вирусов несколько отличается от той, которая применяется для вирусов гриппа. Из пробирок с зараженными культурами сливают среду. Слой клеток промывают раствором Хэнкса (pH 7,4—7,8). Затем в пробирку вносят по 0,2 мл боратного буфера (pH 9,0) и инкубируют в течение 30 минут при 37°. После этого добавляют в культуры гусиные эритроциты. Пробирки тщательно встряхивают и оставляют на 1 час при 4°, а затем сливают жидкость и просматривают монослой клеток под малым увеличением микроскопа. Характерным признаком гемадсорбции является агглютинация эритроцитов на клеточной поверхности.
Таблица 23
Реакция задержки гемадсорбции
Тип Дни Контроль 1 : 10 Разведение сыворотки 1 : 160 Kohtj ОЛЬ
вируса наблюдения вируса 1 : 20 ] 1 : 40 | 1 : ЬО ткани
А 1 А- --- --- 4- 4- ---
о , 1
3 -f -г ¦ 1 4~ __
А1 1 4- + 4- 4- ---
2 -г + + -'г -г + _
3 4- + _L ~г + + ---
1
А2 1 Л- > + + т 1 ---
2 + л~ + Ч~ -f ---
3 -4- -i- -f- _j_ -L ---
В 1 -j- •г + 1 4- ¦ ---
2 + -4- JL _!_ + -1- ---
1
3 + + “Г -( + + ---
Обозначения: + положительная фмадсорбция; —отсутствие гемад-
сорбции.
Наилучшие результаты получены при использовании 1% суспензии эритроцитов. Для ее приготовления рекомендуется брать буферный раствор с pH, оптимальным для выявления гемагглю-тинирующей активности исследуемого вируса. Так, при экспериментах с вирусом киасанурской лесной лихорадки pH суспензии эритроцитов должен быть равен 6,4.
Бакли разработала метод титрования антител к ряду трансмиссивных вирусов с помощью реакции задержки гемадсорбции. Первым очень важным моментом является удаление неспецифических ингибиторов гемагглютинации с помощью каолина. Затем сыворотку разводят 1 :10 в боратном буфере (pH 9,0). Из данного разведения приготавливают последующие. Равный объем соответствующего разведения сыворотки смешивают с 100 тканевыми гемадсорбирующими дозами. Смесь после инкубации вносят в пробирки с культурой ткани. На 5-й день все культуры исследуют с помощью реакции гемадсорбции. При нейтрализации вируса исследуемой сывороткой гемагглютинины не образовывались и реакция гемадсорбции была отрицательной.
Предыдущая << 1 .. 75 76 77 78 79 80 < 81 > 82 83 84 85 86 87 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed