Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 80

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 101 >> Следующая

Эти факты получили подтверждение в работах и других исследователей. Однако Вонка, Жачек и Дубен (VonKa, ZadeK, Du-ben, 1960) указанное расхождение титров склонны интерпретировать иначе. По их мнению, это явление связано не с существованием антител с разной степенью авидности, а обусловлено некоторыми существенными различиями самой техники постановки опытов. При внесении 0,1 мл смеси иммунной сыворотки с рабочей дозой вируса в пробирку с однослойной культурой ткани она разводится питательной средой в 10—20 раз. В то же время при постановке цветной пробы исследуемую смесь после добавления 0.25 мл клеточной взвеси разводят лишь в 0,33 раза. Поэтому в первом случае создаются условия для более выраженной диссоциации нейтральной смеси — явление, известное в иммунологии как феномен разведения.
ТИТРОВАНИЕ ВИРУСОВ И АНТИТЕЛ ПО ГЕМАДСОРБЦИИ
Реакция гемадсорбции была разработана Фогелем и Щелоко-вым в 1957 г. (Vogel, Shelokov, 1957). Они показали, что эритроциты кур и морских свинок адсорбируются на клетках почек обезьян, зараженных вирусом гриппа. При этом дегенеративные
Рис. 36. Диффузный тип гемалсорбции. X 70.
изменения становятся более отчетливыми и легко выявляются при малом увеличении.
Щелоков, Фогел и Ши (SheloKOv, Vogel, Chi, 1958) установили, что для реакции гемадсорбции могут быть использованы эритроциты обезьян, барана ,и человека 0 группы крови, четкая гемад-сорбция наблюдалась также в культурах почечного эпителия обезьян и куриных фибробластов. .При работе с клетками амниона человека, тестикул обезьян и почек теленка были получены отрицательные результаты.
А. Г. Букринская (1960) изучала гемадсорбцию вирусов гриппа A, Al, А2, В1, гриппа свиней, ньюкасльской болезни, эпидемического паротита, Сендай, НА1, НА2, С А в однослойных культурах почек обезьян, легких эмбриона человека и мышц куриного эмбриона. При использовании эритроцитов морских свинок или человека она наблюдала два типа гемадсорбции: остров-ковый и диффузный (рис. 35, 36). Первый характерен для лабораторных штаммов вируса гриппа A, Al, А2, В, гриппа свиней и эпидемического паротша. Диффузная гемадсорбция имела место при работе с парагриппозными вирусами Сендай, HAl, НА2 и СА. Вирус ньюкасльской болезни занимал промежуточное положение между этими двумя группами.
А. К- Алексеева (1959) сравнивала выявление вирусов гриппа в разных культурах ткани (преимущественно эмбриональных) с помощью реакции гемадсорбции или гемагглютинации, а также по развитию цитопатогенного эффекта. Во всех исследованных культурах отмечалось поражение клеток, интенсивность дегенерации была недостаточной, чтобы ее можно было использовать в качестве надежного критерия размножения вируса. Так, вирус гриппа А в культурах эпителия почки эмбриона свиньи вызывал дегенерацию 44% клеток, а в культурах СОЦ — 60%. При заражении вирусом гриппа А2 клеток почки эмбриона) мыши, белой крысы, морской свинки или кролика число пораженных клеток колебалось от 39 до 57%. Образование гемагглютининов в культуральной жидкости отмечали лишь в клетках СОЦ при экспериментах с вирусом гриппа А2 и в 3 культурах из 6, зараженных вирусом гриппа А. Наиболее надежным для выявления вируса оказался метод гемадсорбции (табл. 22).
Открытие явления гемадсорбции у вирусов, активно размножающихся в культурах ткани, но не вызывающих при этом или вызывающих незначительную дегенерацию, позволило разработать простые методы титрования вирусов и антител.
Возможность выявления антител к вирусам гриппа с помощью реакции задержки гемадсорбции показана в работе В. Д. Соловьева и А. К. Алексеевой (1959).
Реакцию задержки гемадсорбции ставят следующим образом. Иммунную сыворотку разводят от I : 10 до 1 : 160. К каждому разведению добавляют равный объем инфекционного материала, содержащий 8 гемагглютинирующих единиц. Смесь оставляют на
! час при комнатной температуре, затем по 0,2 мл смеси вносят в 10 пробирок с однослойными культурами клеток почек обезьян. Ежедневно отбирают несколько пробирок, сливают среду и добавляют 0,2 мл 0,4% взвеси куриных эритроцитов. Пробирки оставляют на 3—5 минут в горизонтальном положении при комнатной температуре, после чего их встряхивают и просматривают под малым увеличением микроскопа. Реакцию оценивают по четырех-крестнон системе.
Таблица 22
Пригодность различных тканей для культивирования вирусов гриппа и методы его индикации
Штамм Вия ткани Наличие Титр Титр Дегенера-
вирус» гемадсорб инфекци гемагглю* 1ШЯ
ции онное™ тинбции клеток, %
А (Шклявер, Эпителий почки обезья КГ4 1 г 16 70
1948) ны .........
Клетки СОИ..... -j- 10-1 1:4 60
Эпителий почки эмбри ' 1СГ3 1:4 44
онов сниней ....
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed