Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Анджапаридзе О.Г. -> "Культура ткани в вирусологических исследованиях" -> 73

Культура ткани в вирусологических исследованиях - Анджапаридзе О.Г.

Анджапаридзе О.Г. Культура ткани в вирусологических исследованиях — Москва, 1962. — 207 c.
Скачать (прямая ссылка): kulturarkani1962.djvu
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 101 >> Следующая

нейтрализации в культуре ткани получил результаты, близкие по своей точности к результатам исследования сывороток на мышах при интрадеребральном заражении.
В отечественной и зарубежной литературе весьма широко освещен вопрос о цитопатогенном действии вируса японского энцефалита В в разных тканевых культурах.
Шерер и Сивертон (1954) описали развитие дегенерации клеток HeLa, зараженных вирусом японского энцефалита В. Однако им удалось проследить цитопатогенное действие лишь до 4-го пассажа. Четкое и постоянное развитие цитопатогенного энцефалита отмечено в зараженных культурах Детройт-6 и почечного эпителия хомячков [Кисслинг, 1957, Макколум, Фоли (McCollum, Foley, 1957)].
Фан Цзи-мин (1959) подробно изучил размножение вируса японского энцефалита В в культурах клеток HeLa, СОЦ, кожномышечной ткани эмбриона человека и куриного эмбриона. Им установлено, что во всех исследованных культурах происходит размножение вируса. Однако развитие деструктивных изменений отмечено лишь в клетках СОЦ и HeLa. В культурах СОЦ цитопатогенное действие наблюдали при первом пассаже, а в клетках HeLa — после 6-го пассажа. При титровании вируса в клетках СОЦ и на мышэх получали практически равнозначные результаты.
В работе Фан Цзи-мина Е. Н. Левкович м К- В. Фокиной (19601 описано цитопатогенное действие вируса японского энцефалита В в культуре клеток ангиосаркомы. Параллельное титрование в этих клетках и на мышах показало, что последние примерно в 10— 100 раз более чувствительны.
С. Я. Гайдамович и В. Р. Обухова (1959) установили возможность количественных исследований вируса японского энцефалита В в однослойных культурах почек эмбрионов овец, В указанных клетках регулярно выявляется цитопатогенное действие уже при первичном заражении. Титр вируса по цитопатогенному действию был, как правило, ниже на единицу логарифма по сравнению с титром, выраженным lg LD50.
Наибольший интерес представляют исследования, посвященные изучению размножения в культуре ткани вирусов весенне-летнего клещевого энцефалита.
В 1956 г, Окер-Блюм (Окег-Blom, 1956) сообщил об адаптации вируса шотландского энцефаломиелита к клеткам HeLa и использовании этих клеток для выявления антител к вирусам весеннелетнего клещевого энцефалита или шетландского энцефаломиелита методом гашения цитопатогенного эффекта.
Е. Н. Левкович, Л. Г. Карпович (1960) исследовали размножение в клетках HeLa 25 штаммов вируса весенне-летнего клещевого энцефалита, шотландского энцефаломиелита, так называемых вирусов двухволнового менинго-энцефалита и молочной лихорадки, возбудителей омской геморрагической лихорадки и и киасанурской лесной лихорадки. Интенсивное и регулярное
развитие цитопагогенных изменений отмечено в опытах с вирусами шотландского энцефаломиелита, омской геморрагической лихо-радки и киасанурской лесной лихорадки. При титровании мозговых суспензий в культуре ткани и на мышах постоянно отмечали более низкие значения ТЦД50 по сравнению с LDsn. Для вирусом шотландского энцефаломиелита и киасанурской лесной лихорадки разница между DLS0 и ТЦД5о составляла 2 единицы логарифма, для вируса омской геморрагической лихорадки — 4—5 единиц. Все испытанные штаммы весенне-летнего клещевого энцефалита вызывали дегенеративные изменения в клетках лишь при использовании разведений порядка 10 1 — 10 -,г> и редко 10 3>5.
На основании изложенного Е. Н. Левкович и Л. Г. Карпович предлагают использовать клетки HeLa не только для титрования вирусов киасанурской лесной лихорадки, омской геморрагической лихорадки и шотландского энцефаломиелита, но и для их дифференцирования от вируса весенне-летнего клещевого энцефалита.
Либикова (LibiKova, 1959) изучила размножение 8 штаммов вируса весенне-летнего клещевого энцефалита в клетках HeLa. Она установила, что все штаммы уже при первичном заражении вызывают цитоиатогенные изменения в клетках. Правда, цитопа-югенное действие суспензии из мозга больных мышей было в 1000—10 000 раз ниже по сравнению с их вирулентностью при интраиеребральнсш введении мышам. После 20 пассажей отмечено повышение цитопатогенной активности одних штаммов в 4—20, а других в 1000—10000 раз.
Либикова и Вильчек (Libikova, Vilcek, 1959) отметили, что развитие цитопатогенного эффекта в клетках HeLa сопровождается подавлением их метаболической активности. Они провели серию титрований вируса весенне-летнего клещевого энцефалита по его цитопатогенной активности, по способности подавлять метаболическую активность клеток HeLa и путем интрацеребрального заражения мышей. Согласно их данным, при исследовании вируса, адаптированного к размножению в мозгу мышей, оба метода титрования в культуре ткани дают одинаковые результаты, но эти результаты в 100 000—1000 000 раз ниже значений LD,TO. По мере адаптации к клеткам HeLa различие между величинами ТЦДм и LDfio уменьшается и после 22 пассажей практически исчезает.
Анализируя результаты своих исследований, Либикова и Вильчек (1960) признают, что клетки HeLa мало пригодны для количественных исследований неадаптированного вируса клещевого энцефалита. Однако наличие четкого цитопатогенного эффекта при заражении культур вирусом, прошедшим большое число пассажей в клетках, позволило авторам разработать интересный метод определения нейтрализующих свойств сывороток. Сущность метода сводится к следующему. В пробирки вносят 15 000 клеток HeLa. В качестве среды используют раствор Хэнкса с 40% лошадиной сыворотки. Одновременно с клетками добавляют 0.1 млсоот-пя^крпрния rhdvcs или 0,2 мл смеси вируса с сыво-
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 101 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed