Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Албертс Б. -> "Молекулярная биология клетки " -> 145

Молекулярная биология клетки - Албертс Б.

Албертс Б., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 504 c.
ISBN 5-03-001985-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiya1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 139 140 141 142 143 144 < 145 > 146 147 148 149 150 151 .. 251 >> Следующая

рентгеноструктурного анализа). А. Каждый аминокислотный остаток молекулы
белка изображен здесь в виде маленького шарика. Одна из тяжелых цепей
показана белым цветом, другая - темно-серым. Домены легких цепей показаны
цветными. Молекула антитела гликозилирована: олигосахаридная цепь,
прикрепленная иомену Сн2, изображена светлосерой. Б. Пространственная
укладка всей легкой цепи. Как вариабельный, так и константный домены
состоят из двух P-слоев (один из них составлен из трех отрезков цени, а
другой из четырех). Полипептидные цепи в этих двух слоях показаны разными
цветами; слои соединены между собой дисульфидной связью. Обратите
внимание, что все гипервариабельные области образуют петли на дальнем
конце вариабельного домена, где они сближаются и формируют часть антиген-
связывающего участка (А - по Е. W. Silverton et al., Proc Natl. Acad.
Sci. USA 74, 5140, 1977; Б - no M.
Schiffer at al., Biochemistry, 12.4620, 1973. Copyright 1973 Amer. Chem.
Soc.)
и Н-вариабельных доменов совместно образуют одну антиген-связывающую
поверхность. Размеры и форма каждой такой поверхности варьируют в
зависимости от конформации полипептидной цепи в гипервариабельных петлях,
которая в свою очередь определяется последовательностью боковых цепей
аминокислот в этих петлях. Таким образом, сейчас уже понятны общие
принципы структуры антител.
Заключение
Каждая L- и Н-цепъ иммуноглобулина состоит из вариабельной области длиной
примерно в ПО аминокислотных остатков на N-конце и следующей за нею
константной области, которая имеет такую же длину в L-цепи и в три или
четыре раза длиннее в Н-цепи. Каждая цепь составлена из повторяющихся,
сходным образом свернутых доменов: у L-цепи имеется один домен в
вариабельной области (Vi) и один в константной области
243
(Ci). а у Н-цепи - один домен в вариабельной области (VH) и три или
четыре в константной области (С"). Изменчивость аминокислотной
последовательности в вариабельных областях L- и Н-цепей ограничена в
основном несколькими небольшими гипервариабелъными областями, которые
пространственно сближены друг с другом и образуют антиген-связывающий
участок. Этот участок имеет размеры, достаточные для того, чтобы
контактировать с антигенной детерминантой, соответствующей по величине
пяти или шести остаткам сахара.
18.4. Как создается разнообразие антител
По имеющимся оценкам, даже в отсутствие антигенной стимуляции у мыши
может вырабатываться много миллионов разных молекул антител, - это ее
преиммунный репертуар. Поскольку антиген-связывающие участки многих
антител могут перекрестно реагировать со множеством близких, но
различающихся антигенных детерминант, преиммунный репертуар, видимо,
достаточно велик для гого, чтобы почти для каждой потенциальной
антигенной детерминанты нашелся подходящий антиген-связывающий участок.
Антитела представляют собой белки, а белки кодируются генами. Поэтому
разнообразие антител ставит сложную генетическую проблему: каким образом
число видов вырабатываемых в организме антител может превышать число
генов в его геноме? (Полагают, например, что
Рис. 18-29. Трехмерная структура комплекса антиген-антитело (по данным
рентгеноструктурного анализа) Антиген - в данном случае это фермент
лизоцим выделен цветом. Антиген-связывающий участок Fab-фрагмента
антитела образуют совместно две цепи - легкая и тяжелая (на рисунке
светло-серая и темно-серая соответственно). Б. Здесь модели антигена и
антитела разделены, чтобы показать их комплементарные контактирующие
поверхности. Выступ на комплементарной поверхности антигена представляет
собой остаток глутамина. В ряде других антител, исследованных тем же
методом, антиген-связывающий участок (для небольшого гаптена) образует
гораздо более глубокую щель. (A. Amit et al., Science, 233, 747-753,
1986. Copyright 186 by the AAAS.)
244
Кл€?*| МыШииои ммрпомы
•ъдобаг" in gin щая П*Г*й1" иЕПИ А
ДНК )"cip* ируют и рас щепгяю"
рестри"*иомм".]м
фермгмтом
"L г"
Ррстрикцио НИ ЫЛ
фрагменты ДНК додопчю* с помощью плеч трофоргм
-Г*н Г
-Геи
ffftfCvaf
Рис. 18-30. Эксперимент, который прямо показал, что в ходе развития В-
клеток ДНК подвергается перестройке. Была экстрагирована ДНК из мышиной
опухоли плазматических клеток (миеломы). синтезирующей специфическую
легкую цепь Ig, и из 13-дневного мышиного эмбриона, у которого антитела
еще не вырабатываются. Ту и другую ДНК расщепляли рестрикционной
эндонуклеазой и полученные фрагменты подвергали электрофорезу в агаровом
геле.
Затем выявляли фрагменты, в которых имелись последовательности,
кодирующие С-область L-цепи, и фрагменты с кодом для определенной V-
области L-цепи (для этого использовали гибридизацию по Саузерну с двумя
радиоактивными ДНК-зондами: один из них был комплементарен кодирующей
последовательности для V-области, а другой - для С-области мРНК для
специфической L-цепи миеломы) (разд. 18.3). В ДНК клеток миеломы
последовательности, кодирующие С - и V-области, были обнаружены в составе
Предыдущая << 1 .. 139 140 141 142 143 144 < 145 > 146 147 148 149 150 151 .. 251 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed