Общая аллергология - Адо А.Д.
Скачать (прямая ссылка):
1 Отсюда относительная молекуляпрная масса молекулы (72 500X2) + (22 600x2) = = 190 200.
Реагины относятся к пспрецинитирующим антителам, т. е. не дают с антигеном видимого осадка в жидкой среде или в желе. Это создает некоторые трудности определения их содержания! в сыворотке крови. В настоящее время предложено и используется много методов определения содержания реагинов в сыворотке крови. Все эти методы в конечном счете основаны па том, что комплекс реагин + аллерген соединяется с субстратом, который можно заметить радиологическими измерениями (ауторадиография, радиосорбция, флюоресценция и т. д.). Существуют методы
Пап Пепсин
rssi Г81 | 1
|-SS---| j---ss---
6I. El. e2
(пп.. и--- q 0 -........J 1---s S---' SIS 1---SS---1 1---SS---1 ---SS--- ---SS---1 ---SS--- ---SS---.
--Ki-
4 ........... ......
11 1 Fc
---ss---‘ ^---SS '
Fae
Схома8
СТРОЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНА В (РЕАГИНА).
Примечание, во, в., е2 — фрагмвпты тяжелых цепей иммуиогл о б \гл тш а; вертикальные стрелки — места расщеп®едля тяжелых цепей иапапиом и пепсином; Fab, Fc, Fci — фрагменты тяжелых цепей иммуноглобулинов.
определения общего IgE и иммуноглобулина против какого-либо отдельного аллергена (специфические IgE). Метод определения общего IgE, разработанный Aufongo с соавт. в Марселе, основан па принципе простой
Т а б л и ц а 24
Некоторые свойства фрагментов иммуноглобулина Е
Ферменты Продукты Молекулярная Электро Антигенгш структура Константа
гидролиза масса форез *0 <4 •а *
Паиаип Латнвиый 200 ООО Yi ¦ + + 7,9 S
белок
Начало 150 ООО 7i + 6,3 S
гидролиза
Fc 94 ООО 7i --- + --- 5,1 S
Fab 49 ООО 72 + --- ,--- + 3,4 S
Fc' 57 ООО а --- --- н- 3,4 S
Пепсин F(ab')a 150 ООО 7i **j- --- + 6,2 S
Трипсин F(ab)2 103 ООО + 4" --- + ---
Fc" , 40 000 “ + ¦--- ------ 6,7 S
радиальной иммунодиффузии Манчини. Иммуштую анти-IgE человеческую сыворотку барана смешивают с агаром и разливают на пластинки с расчетом получить слой в 1 мл толщиной. В агаре делают лупки диаметром 3 мм, в которые разливают стандартные разведения IgE от 1: 2 до 1:256. Подобным же образом и в таких же разведениях разливают сыворотку крови исследуемого больного. Пластины с агаром выдерживают во влажной камере при температуре 37°С два дня, а потом отмывают фосфатным буфером pH 7,2 и 0,15 М NaCl. Потом их помещают в раствор, содержащий иммунную сыворотку кролика против белков сыворотки ба-
Рис. 25. Схематическое изображение присоединения гемолизина к «летке и комплементу и присоединения реагина к клетке и аллергену.
Длинные линии — тяжелые цепи гемолизина или реагина; короткие линии — легкие цепи этих же антител.
рана. Иммунная сыворотка помечена 1251. Через 12 ч пластины отмывают раствором фосфата при 4°С и далее два дня — дистиллированной водой. Далее их высушивают при комнатной температуре в течение двух дней и ауторадиографируют на рентгеноплепке. Диаметр полученных зон диффузии учитывают по методу Манчини. Существуют варианты метода, когда вместо обработки комплекса антисыворотки барана и IgE аитиба-раньей сывороткой кролика последнюю метят не 1251, а флюоресцирующим изотиоцианатом. Интенсивность флюоресценции отражает степепь содержания IgE в исследуемой сыворотке. Содержание IgE вычисляют по номограмме.
Как уже указывалось, важнейшим биологическим свойством реагинов, отличающим их от других видов антител, является способность фиксироваться на коже и других тканях. Установлено, что каждые две молекулы реагина, фиксируясь на ткани, присоединяют одну молекулу аллергена (рис. 25),
