Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Адо А.Д. -> "Общая аллергология" -> 44

Общая аллергология - Адо А.Д.

Адо А.Д. Общая аллергология — М.: Медицина, 1978. — 468 c.
Скачать (прямая ссылка): obshayaallergologiya1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 262 >> Следующая

В составе этих фракций 17,1% (Е) и 16,6% (К) азота и по 0,5% углеводов. Изоэлектрическая точка антигена Е находилась при pH 5,0, а аптн-гоиа К — при pH 5,9. Принцип выделения этих фракций представлен King (1974) в виде схемы 4 (несколько сокращенно).
Антиген Е состоит из двух частей с относительной молекулярной массой 22 000 и 16 000, соединенных прочно нековалептными связями в водном нейтральном растворе. Части денатурированного антигена Е в 1000 раз менее активны в кожных пробах у людей, больных поллииозом.
Исследование химического состава антигенов Е н К, выделенных King7 а такжо фракций, выделенных другими методами (Augustin et. al.), показало, что наиболее активными фракциями являются белки с относительной молекулярной массой от 5000 до 40 000. Фракции, богатые различными углеводами, как правило, оказывались малоактивпымп или совершенно неактивными при испытании в кожных пробах у больных.
Азотсодержащая часть активного материала состояла из следующих аминокислот: лизина, гистидина, аргинина, оксипролииа, аспарагиновой кислоты, трионина, серина, глютаминовой кислоты, пролина, глицина, аланина, цистеина, метионина, валииа, изолейцина, лейцина, тирозина, фенилаланина, триптофана. Кроме того, активный материал содержал арабииозу {2,4%), гексозамин (0,3%), гексуроновую кислоту (0,4%); в нем не обна-
ружено минеральных составных частей. Коэффициент седиментации материала S20W составлял 3,0±0,1 • 10-13 см/с. Активную аллергенную фракцию, свободную от белков, получил из экстрактов пыльцы амброзии Sehon (1959). Он удалял весь белок из экстракта пыльцы амброзии, приготовленного по методу Кока, с помощью ультрацентрифугирования и мембранных фильтров и далее с помощью препаративного электрофореза получал весьма активную поляпептидную фракцию, состоящую из 8 аминокислот. Он назвал эту фракцию A—Ai—D, она была в 1000 раз активнее исходного экстракта. Активный полипептид состоял из аргинина, лизина, глютаминовой кислоты, глицина, аланина, оксипролина, валина и норлей-цина. Константа седиментации была 1,20 *10-13 см/с.
Интересные данные получены по вопросу о свойствах аллергенов пыльцы трав. Установлено, что аллергены пыльцы луговых трав представляют собой белки с молекулярной массой от 10 000 до 32 000 (Augustin 1953—• 1955, и др.), выпадающие в осадок при 50% насыщении сульфатом аммония. Они прочно связаны с углеводным пигментным комплексом, не отделяющимся от белка при диализе или при осаждении солями. При нагревании до 100°С в течение 20 мни белок не теряет способности вызывать кожные аллергические реакции (Cooke е. а.). Аллергенные свойства белков пыльцы трав оказались не связанными с их фосфатазной активностью (Augustin).
Malley с соавт. (1962), Marsh с соавт. (1966) предложили метод выделения аллергена из пыльцы тимофеевки луговой, сущность которого за-
С х е м а 4
(ВЫДЕЛЕНИЕ ФРАКЦИЙ ПЫЛЬЦЫ АМБРОЗИИ <ПО KING, 1974)
Остаток пыльцы выбрасывается
Обезжиренные зерна пыльцы амброзии
Экстрагируется водой иди 0,9 насыщения (NEUbSOt
Темно-коричневый смолистый осадок
Растворение в 0,05 М трис—* НС1, pH 7,9 центрифугирования. Сливную жидкость пропустить через се-фадекс g = 25
Фракция Л
0,025 М трис—JIC1
Хроматография через ДЭАЭ **-цел~ лголозу, pH 7,9 0,5 М трис-НС1/0,2 М NaCl
Фракция С
Дальнейшая ее обработка привела м получению мспее активного материала, чом обработка фракции D
Фракция D
Осаокдение, диализ, лиофилизация. Растворение, пропускание через се-фадеис g=100 0,4 М (NHO2SO4 0,05 М трис-НС1 •
• pH 7,4
Хроматография через ТЭАЭ ***-целлюлозу
4-
Повторная хроматография через целлюлозу
4.
Антиген К
Антиген Е
СНцОЫ
I
* Трис-гндроксиметиламинометаи: Н—С—NHa
Н
Хорошими буферными свойствами обладают трис-HGI, трдс-фосфат, трис-сукцинат и др.
** ДЭАЭ — диэтиламиноэтил.
*** ТЭАЭ — триэтиламиноэтил.
ключается в экстрагировании обезжиренных зерен пыльцы 0,127 М фосфатным буфером, pH 10,4, с 10 % глюкозы. В этих условиях 2-аминогруппа лизина пептидов аллергенного материала реагирует с углеводами (Malley vc- соавт., 1962):
Н Н Н
V s | VII
С _NH2 + C — R 52ГС — N — С— R
I II ( f
© О © ОН
и создает окрашенные (меланоидныс) углеводно-пептидные комплексы с высокой аллергенной активностью. Эти комплексы осаждаются далее еульфатом аммония при 0,55% насыщении. Осадок растворяется в воде,
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 262 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed