Общая аллергология - Адо А.Д.
Скачать (прямая ссылка):
Аллергическая альтерация лейкоцитов наблюдается как в реакциях немедленного типа, так и при замедленной гиперчувствительпости (В, А. Фрадкин, 1962).
С. М. Титова (1967), Н. В. Медуницъш и В. Б. Гервазиева (1967) в нашей лаборатории изучали аллергическую альтерацию лейкоцитов у больных поллииозами.
В работе С. М. Титовой был использован метод прижизненной окраски лейкоцитов нейтральным красным. Повреждеиными считались клетки, в которых окрашены ядро, вся клетка, зернистость, расположенная в одной половине или по всей клетке. Такие клетки были пеподвияшы или с за-тормоя^ешшм двшкением. Исследования проведены в течение трех пыльцевых сезонов (1965, 1966, 1967) на 10 здоровых лицах и 65 нелочеиых больных поллинозом с аллергией к пыльце злаковых трав. Испытуемые были обследованы до начала цветения, во время цветения и после окончания сезопа цветения трав. Скарификациоппые кожные пробы у всех больпых были положительными па специфические аллергеиы (из пыльцы тимофеевки и овсяницы) и отрицательными па песпецифический аллерген (из пыльцы ясеня).
По мере нарастания симптомов поллиноза снижалась резистентность лейкоцитов к воздействию забуфереиного физиологического раствора (контроль). Так, у больных, обследованных перед началом сезощ цветения трав и не имевших клинических симптомов поллииоза, процент окрашенных лейкоцитов через 3 мин после их контакта с контрольным раствором в среднем составил 5,7 ±0,65. У больных, которые были обследованы в сезон цветения и имели клинические проявления поллииоза, этот процент был равен 14,7 ±1,37; у больных без клинических симптомов этого заболевания (после сезона цветения трав) он составил 4,6±0,84, у здоровых — 3. По мере нарастания симптомов поллиноза повышался процент окрашенных лейкоцитов при воздействии как специфических, так и неспецифических аллергенов. При этом через 3 мин контакта с контрольным раствором и аллергенами результаты были следующими: в контроле — 14,7 ±1,37%, с аллергенами: тимофеевки— 13,7 ± 1,28 %, овсяницы — 13,2± 1,57 %, ясеня— 11,9± 1,45%. Через 3—4 ч наблюдалась статистически достоверная разница (р<0,001) между результатами реакции в контроле и со специфическим аллергеном (соответственно 12,6± 1,32 и 24,0±2,80%). Реакция на песпецифический аллерген по сравнению с контролем ие имела достоверного различия (13,3 ± 1,22 и 17,1 ± 1,84 %). Наиболее четко разница между результатами в контроле и со специфическим аллергеном проявляется у больных с нерезко сниженной резистентностью лейкоцитов при наличии клинических симптомов болезни. Так, через 3 ч альтерация в контроле составляла 2,81 ±1,22%; со специфическим антигеном (тимофеевка) — 11,6± 1,06 %. Аллергическая альтерация лейкоцитов после контакта со специфическими аллергенами наблюдается еще у больных со слабыми симптомами поллиноза и отсутствует у больных без клинических проявлений.
Таким образом, альтерация лейкоцитов связана с клиническими симптомами поллиноза, при наличии которых сшажается резистентность лейкоцитов. Аллергическая альтерация лейкоцитов больных поллинозом носит специфический характер.
В работе Н. В. Медуницына и В. Б. Гервазиевой был использован метод флюоресценции (окраска акридиновым оранжевым), который позволяет работать с цельной кровыо и наблюдать более тонкие морфологические изменения в лейкоцитах. Последние дифференцированно окрашиваются акридиновым оранжевым и ярко флюоресцируют в черном поле зре-
ния. Эритроциты же не флюоресцируют из-за присутствия гемоглобина, являющегося гасителем свечения.
В работе были использованы аллергены из пыльцы тимофеевки луговой (Phleum. pratense), ольхи серой (Alnus incana), амброзии полыннолистной (Ambrosia artemisiifolia) и дуба (Quercus robur), приготовленные по общепринятой методике на экстрагирующей жидкости Кока в НИИЛ АМН СССР. Кровь брали у больных поллинозами.
В йорме ядра лейкоцитов, окрашенные акридином оранжевым, ярко-зеленые, цитоплазма тускло-зеленая, гранулы в протоплазме кирнично-
Рис. 50. Аллергическая альтерация лейкоцитов у больных поллинозами (по В. В. Гер-вазпевоц).
а — лейкоциты больных после инкубации с неспецифическим аллергеном; б—-лейкоциты больных при взаимодействии со специфическим аллергеном — экстрактом пыльцы тимофеевки (Х450).
красные. Подобное свечение наблюдали в контрольных препаратах. Оно объясняется способностью акридина оранжевого избирательно взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами. Так, РНК цитоплазматических гранул связывает большое количество красителя и дает комплексы оранжево-красного свечения. ДНК связывает краситель в меньшей степени и дает ярко-зеленое свечение. Слабое свечение цитоплазмы обусловлено, очевидно, тем, что внеядерная РНК находится в связанном состоянии с другими компонентами клетки и не имеет свободных связей для реакции с красителем (рис. 50, а).
В опытных препаратах наблюдались лейкоциты, утратившие нормальную круглую форму, с неровными бахромчатыми краями. К этим измененным клеткам были также отнесены клетки без видимой структуры ядра, с явлениями вакуолизации, полным или частичным исчезновением цитоплазматических гранул (рис. 50, б). Было обнаружено, что в среднем процент альтерированных лейкоцитов нелеченых больных, чувствительных к пыльце тимофеевки, равен 69, к пыльце ольхи — 62 и к пыльце амброзии — 72. ’
